埃及伊蚊电压依赖性钠离子通道3′端cDNA的克隆及序列分析

中国媒介生物学及控制杂志

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埃及伊蚊电压依赖性钠离子通道3′端cDNA的克隆及序列分析

吴家红1,2;郭晓霞1;李春晓1; 董言德1; 宋峰林1; 曹晓梅1; 张晓龙1; 赵彤言1

1军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071;2贵阳医学院寄生虫学教研室

出版日期:2008-12-20 发布日期:2008-12-20

Cloning and sequence analysis of the voltage-dependent sodium channel gene 3'end cDNA from Aedes aegypti

WU Jia-hong1;2; GUO Xiao-xia; LI Chun-xiao; DONG Yan-de; SONG Feng-lin; CAO Xiao-mei; ZHANG Xiao-long; ZHAO Tong-yan

1 State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity,Institute of Microbiology and Epidemiology Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China； 2 Department of Parasitology, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, China

Online:2008-12-20 Published:2008-12-20

摘要/Abstract

摘要： 目的扩增埃及伊蚊电压依赖性钠离子通道基因3′末端,并对其核苷酸序列进行分析。方法提取埃及伊蚊雌蚊总RNA,以Trsa为反转录引物反转录成单链cDNA,继而设计阳性与阴性对照,采用巢式聚合酶链反应(PCR)和快速扩增cDNA3′末端(3′RACE)技术,对埃及伊蚊电压依赖性钠离子通道基因3′末端进行PCR扩增、克隆与测序。结果获得钠离子通道基因的3′端核苷酸序列共809bp,包括编码区和非编码区poly(A)尾,编码区共编码208个氨基酸。相似性分析结果显示编码区氨基酸序列与家蝇钠离子通道基因3′端氨基酸序列相似性为65%左右。结论成功获得埃及伊蚊钠离子通道基因3′端,为进一步研究该基因的分子生物学特性奠定了基础。

关键词: 埃及伊蚊, 电压依赖性钠离子通道基因, 快速扩增cDNA3′末端

Abstract: Objective To amplify the 3'end gene sequence of voltage-dependent sodium channel from Aedes aegypti.Methods Total RNA was extracted from the female adult of Ae.aegypti,and a single stranded cDNA was reverse transcripted with Trsa,then to design the positive and negative control,a 3'end cDNA was amplified by nested PCR and 3'RACE technique,and cloning and sequence analysis were performed.Results A total of 809 bp PCR product was obtained,including the coding sequence with 208 amino acids and non-coding sequence with poly(A) tail.Similarity analysis by DNAstar 5.0 showed high similarity(about 65%) comparing to the same region of amino acid sequence from Musca domestica.Conclusion The 3'end cDNA sequence of voltage-dependent sodium channel from Ae.aegypti was successfully obtained.

吴家红1,2;郭晓霞1;李春晓1; 董言德1; 宋峰林1; 曹晓梅1; 张晓龙1; 赵彤言1. 埃及伊蚊电压依赖性钠离子通道3′端cDNA的克隆及序列分析[J]. 中国媒介生物学及控制杂志.

WU Jia-hong1;2; GUO Xiao-xia; LI Chun-xiao; DONG Yan-de; SONG Feng-lin; CAO Xiao-mei; ZHANG Xiao-long; ZHAO Tong-yan. Cloning and sequence analysis of the voltage-dependent sodium channel gene 3'end cDNA from Aedes aegypti[J]. Chines Journal of Vector Biology and Control.

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埃及伊蚊电压依赖性钠离子通道3′端cDNA的克隆及序列分析

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