周水森;汤林华;夏明仪;薛海筹
ZHOU Shui-sen;TANG Lin-hua;XIA Ming-yi;et al
摘要: 目的建立微小按蚊复合体不同亲缘种A和C的分子鉴别方法。方法用单蚊蚊腿消化提取基因组DNA,PCR特异扩增28S第3结构域(D3)基因,对PCR产物进行纯化、克隆、测序和序列分析;基于序列差异设计特异引物,进行等位基因特异扩增(PCR-ASA),根据扩增片段大小区分微小按蚊不同亲缘种。结果发现微小按蚊不同亲缘种A和C(GeneBank登录号:AF416782,AF425594),根据二者序列差异设计的特异引物能在普通琼脂糖凝胶上直观地区分两亲缘种,两者除在376bp处有一共同条带外,分别在294bp和112bp处出现各自的特异扩增带。结论我们建立的ASA分子鉴别方法能有效地将我国微小按蚊不同亲缘种A和C区分开来。